临床与实验病理学杂志Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２０１７ Ｍａｙ；３３（５） ・５２５・ 网络出版时间：２０１７—５—１７ ２３：５３ 网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０７３．Ｒ。２０１７０５１７．２３５２．０１２．ｈｔｍ１ 非小细胞肺癌中磷酸化ＦＲＫ蛋白的表达及预后分析 李丽 ，寇玉玲 ，陈菲 ，孙兴旺 摘要：目的探讨非小细胞肺癌（ｎｏｎ—ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ，ＮＳＣＬＣ）中磷酸化ＦＲＫ（ｐｈｏｓｐｈｏ—ＦＲＫ，ｐ－ＦＲＫ）蛋白的表达及其预 后分析。方法 应用免疫组化ＥｎＶｉｓｉｏｎ两步法检测１６２例ＮＳＣＬＣ组织及其远端对照组织中ｐ－ＦＲＫ蛋白的表达水平，并分析 ｐ－ＦＲＫ蛋白表达与ＮＳＣＬＣ患者临床病理特征的相关性，评价ｐ－ＦＲＫ在ＮＳＣＬＣ患者预后中的价值。结果ｐ－ＦＲＫ蛋白在 ＮＳＣＬＣ中的阳性率明显高于远端对照组织（５１．９％ １１．７％，Ｐ＝０．００１）。ｐ－ＦＲＫ蛋白阳性水平与ＮＳＣＬＣ病理组织类型、淋 巴结转移、ｐＴＮＭ分期均显著相关（Ｐ＜０．０５）。Ｋａｐｌａｎ—Ｍｅｉｅｒ生存分析显示ｐ－ＦＲＫ表达水平与患者术后总生存率呈负相关（ｘ ＝１７．８４９，Ｐ＜０．００１）。多因素生存分析显示ｐ－ＦＲＫ蛋白是ＮＳＣＬＣ患者术后不良预后的预测因素（ＨＲ＝０．４９６，９５％Ｃ／： ０．２９５—０．８３６，Ｐ＜０．０５）。结论中图分类号：Ｒ ７３４．２ ｐ－ＦＲＫ阳性患者预后较差，有望成为ＮＳＣＬＣ患者预后判断的新型标志物。 文章编号：１００１—７３９９（２０１７）０５—０５２５—０５ 关键词：肺肿瘤；非小细胞肺癌；Ｓｒｃ激酶家族；ｐ－ＦＲＫ；预后 文献标志码：Ａ ｄｏｉ：１０．１３３１５／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｃｅｐ．２０１７．０５．０１２ 肺癌发病率与病死率在我国恶性肿瘤中均居首 位，在男性及女性中的病死率分别为２９．５％和 ２２．５％…。肺癌分为非小细胞肺癌（ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ，ＮＳＣＬＣ）和小细胞肺癌（ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ １材料与方法 １．１材料收集华西医院２００７年１月～２００７年 １２月病理科确诊为ＮＳＣＬＣ且患者术前均未行放、 ｃａｎｃｅｒ，ＳＣＬＣ），其中８Ｏ％～８５％肺癌为ＮＳＣＬＣ， ＮＳＣＬＣ进一步分为３个病理组织学亚型：腺癌 化疗及免疫治疗的石蜡标本１６２例。其中男性１１６ 例，女性４６例，最小年龄３４岁，最大年龄８１岁，中 位年龄６０岁。按照第７版国际抗癌组织联盟 （ＵＩＣＣ）的ＮＳＣＬＣ分期标准：６１例Ｉ期、３８例Ⅱ期、 ５３例Ⅲ期、ｌＯ例Ⅳ期，其中９ｌ例腺癌、７ｌ例鳞癌。 本组标本均通过华西医院伦理委员会批准，且患者 签署书面知情同意书。１６２例ＮＳＣＬＣ组织及其远 端对照组织均行石蜡切片ＨＥ染色，并由两位病理 医师分别确认病理组织学类型。 １．２试剂一抗为兔抗人ｐ－ＦＲＫ抗体，购自Ｂｅａ． ｃｏｍＢｉｏ公司（ＢＩＯ１００４３１），工作液稀释比例１：１００； 抗体稀释液（￥２０２２，ＤＡＫＯ，丹麦）；二抗为山羊抗 兔／鼠ＩｇＧ／ＨＲＰ（Ｋ５００７１１，ＤＡＫＯ，丹麦）；５０ｘ抗原 （３０％～４０％）、鳞癌（２０％～２５％）和大细胞癌 （１５％～２０％） Ｊ。尽管肺癌的诊断及治疗水平不 断发展，但其５年生存率仅为１７％ ，所以寻找肺 癌发生、发展及对治疗有价值的蛋白尤为重要。近 年研究发现，Ｓｒｃ激酶家族可通过影响肿瘤细胞的增 殖、分化、迁移、黏附和凋亡，从而在肿瘤的发生、发 展、转移中起重要作用＿４ Ｊ。随着研究的不断深入， 发现Ｓｒｃ激酶家族中ＦＲＫ（ｆｙｎ—ｒｅｌａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ）在不同 类型肿瘤中发挥促进或抑制肿瘤生长的作用 ＂ 。 但磷酸化ＦＲＫ（ｐｈｏｓｐｈｏ．ＦＲＫ，Ｐ－ＦＲＫ）蛋白在 ＮＳＣＬＣ肿瘤组织中的表达尚未见报道。本文收集 １６２例肺癌标本及其远端对照组织，采用免疫组Ｅｎ－ Ｖｉｓｉｏｎ两步法检测两组中ｐ－ＦＲＫ表达强度差异，并 分析其与ＮＳＣＬＣ临床病理特征及预后的相关性。 修复液（ＥＧＴＡ组织抗原修复液，ＭＶＳ－Ｏ０８０，福州迈 新公司）；Ｓｕｐｅｒ ＰＡＰ Ｐｅｎ超级免疫组化油笔（ＰＥＮ一 ０００２，福州迈新公司）；Ｈａｒｒｉｓ苏木精（７２１１，Ｔｈｅｒｍｏ， 美国）。 １．３免疫组化免疫组化染色采用ＥｎＶｉｓｉｏｎ两步 法。石蜡标本连续４ Ｉｘｍ厚切片，６０℃烤箱烤片２ 接受日期：２０１７—０３—２２ 作者单位： 西南医科大学附属医院病理科，泸州四川大学华西医院病理研究室，成都作者简介：李６４６０００ ６１００４１ ｈ，３７℃烤箱烤片过夜，二甲苯脱蜡、梯度乙醇脱二 甲苯至流水冲洗切片，ＥＧＴＡ（ｐＨ ９．０）抗原修复液 ９８℃水浴修复３０ ｍｉｎ，３％Ｈ Ｏ：溶液阻断内源性过 氧化物酶室温１５ ｍｉｎ，滴加１００～２００ Ｌ的ｐ－ＦＲＫ 丽，女，硕士研究生。Ｔｅｌ：（０２８）８５１６４１７０，Ｅ—ｍａｉｌ ｌｉｌｙｍｃ＠１６３．ｃｏｎ 孙兴旺，男，教授，通讯作者。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｙｓｕｎｘｗ＠１６３．ｃｏｎ （１：１００），４℃孵育过夜，室温复温３０ ｍｉｎ，滴加１００ ・５２６‘ 临床与实验病理学杂志．，Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２０１７ Ｍａｙ；３３（５） ～２００ ｔｘＩ Ｋ５００７１１试剂盒内的多聚物酶标二抗（即 用型），３７ 孵育４５ ｍｉｎ，孵育完毕，ＤＡＢ在显微镜 下控制显色，Ｈａ￣ｗｉｓ苏木精复染３ ｒａｉｎ，流水冲洗返 蓝，梯度乙醇脱水、二甲苯透明２次，Ｃｌｅａｒｖｕｅ封片 机完成封固，Ｏｌｙｍｐｕｓ ＢＸ５１显微镜下观察。每一批 次免疫组化实验均设置阴性对照，阴性对照用ＰＢＳ 代替一抗。 １．４结果判定ｐ－ＦＲＫ蛋白阳性定位于细胞胞质， 免疫组化结果由两位病理医师阅片进行判断 根据细胞着色程度和阳性细胞占所观察细胞百分比 的评分乘积进行半定量，随机选择２００倍视野下ｌ０ 个无交叉重复的视野，且每个视野下计数ｌ００个肿 瘤细胞，按细胞着色程度评分：无阳性着色为０分， 浅黄色为１分，棕黄色为２分，棕褐色计为３分。按 阳性细胞所占观察细胞百分比评分：无阳性细胞为 ０分，≤２０％为１分，２ｌ％～４９％为２分，ｉ＞５０％为３ 分。将每一张切片的两项分值相乘：０为阴性（一）， １～３为弱阳性（＋），４～６为中度阳性（＋＋），＞６为 强阳性（卅）。统计分析时将（一）定义为蛋白阴性， （＋～卅）定义为蛋白阳性 １．５随访。 对１６２例ＮＳＣＬＣ患者进行电话或定期 图１ Ａ．肺腺癌ｔｆ】ｐ－ＦＲＫ呈刚性，ＥｎＶｉｓｉｏｎ 步法：Ｂ．肺鳞癌『Ｉ１ Ｐ— ＦＲＫ呈阳性，ＥｎＶｉｓｉｏｎ两步法 ２．２ Ｐ－ＦＲＫ表达与ＮＳＣＬＣ临床病理特征的相关性 １６２例ＮＳＣＩ Ｃ中，ｐ－ＦＲＫ表达与肿瘤大小有关，１、２ ＋ ＋ｒｒ４组ｐ－ＦＲＫ的阳性率明显高于Ｔｌ组，组问比 较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；ｐ－ＦＲＫ蛋白表达水 门诊、复诊随访。随访从手术之日开始，失访、死于 其他疾病或在随访时仍存活视为截尾数据。总生存 期定义为从第一次确诊开始至死亡或随访终点时 间。 平在淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组（尸＜ ０．０５）；临床分期Ⅲ＋Ⅳ期组ｐ－ＦＲＫ蛋白表达水平明 显高于Ｉ＋Ⅱ期患者（Ｐ＜０．０５）。ｐ－ＦＲＫ表达 ｊ患者性 别、年龄均无相关性（Ｐ＞０．０５，表１）。 表１ ｐ－ＦＲＫ表达与ＮＳＣＩ Ｃ临床病理特征的相关性 １．６统计学方法所有数据应用ＳＰＳＳ ２２．０软件 进行统计学处理，采用ｘ 检验及Ｆｉｓｈｅｒ精确检验进 行率的比较分析；生存率采用Ｋａｐｌａｎ—Ｍｅｉｅｒ法分析 统计；采用Ｌｏｇ—ｒａｎｋ检验分析各变量与预后的关系； 采用Ｃｏｘ回归模型进行多因素分析。Ｐ＜０．０５为差 异有统计学意义。 ２ 结果 ２．１ ＮＳＣＬＣ及远端组织中Ｐ－ＦＲＫ的表达 ＮＳＣＬＣ肿瘤组织中ｐ－ＦＲＫ阳性定位于细胞质，呈棕 黄色弥漫性或颗粒状着色；远端组织中肺泡上皮细 胞、终末细支气管上皮细胞均无明显ｐ－ＦＲＫ阳性着 色，仅少量细胞问质着色，阳性着色程度及阳性细胞 百分比明显低于肿瘤组织。ＮＳＣＬＣ肿瘤组织中Ｐ— ＦＲＫ蛋白阳性率明显高于远端组织（５Ｉ．９％ＵＳ ｌ１．７％，ｘ ＝１０．５５６，Ｐ＝０．００１），两组间差异有统计 学意义。在１６２例ＮＳＣＬＣ中，ｐ－ＦＲＫ在腺癌中阳性 率高于鳞癌（５９．３％ ４２．３％，ｘ ＝４．６６４，Ｐ＝ ０．０３１），差异有统计学意义（图１）。 临床与实验病理学杂志Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２０１７ Ｍａｙ；３３（５） ∞ ∞加∞如∞如加ｍ ０ ・５２７・ ∞ 鲫 印∞们如加２．３ Ｐ－ＦＲＫ表达与ＮＳＣＬＣ患者生存时间的关系 表３多因素Ｃｏｘ比例风险模型分析ＮＳＣＬＣ患者 应用Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ法对１６２例ＮＳＣＬＣ患者进行生存 分析，结果显示：患者总生存期为１—６３个月，中位生 存期为１２个月；患者１—５年生存率分别为８５．７％、 ５７．１％、３５．４％、１９．４％、２．３％（图２）。ｐ－ＦＲＫ阳性组 总生存期及预后风险因素 与ｐ－ＦＲＫ阴性组间生存率差异有统计学意义（ｘ ＝ １７．８４９，Ｐ＜０．００１，图３）。采用Ｃｏｘ风险比例模型，将 患者性别、年龄、病理类型、肿瘤大小、淋巴结转移、Ｐ． ３讨论 ＴＮＭ分期、ｐ－ＦＲＫ表达均纳人分析。单因素分析结 果发现：ｐ－ＦＲＫ表达、ｐ－ＴＮＭ分期、淋巴结转移与 ＮＳＣＬＣ患者术后生存率有显著相关性（Ｐ＜０．００１，表 ２）。将单因素分析中对患者生存率有显著影响的Ｐ． ＦＲＫ表达、ｐ－ＴＮＭ分期、淋巴结转移因素纳入Ｃｏｘ回 归模型，进行多因素分析结果发现：ｐ－ＦＲＫ表达是肺 癌患者预后的影响因素（Ｐ＜０．０１，表３）。 斟 灶 总生存期（月） 图２ ＮＳＣＬＣ的总生存期曲线 斛 灶 ０ １２ ２４ ３６ ４８ ６０ 总生存期（月） 图３ ｐ－ＦＲＫ阴性组与阳性组的总生存期曲线 表２单因素Ｃｏｘ比例风险模型分析ＮＳＣＬＣ患者 总生存期及预后风险因素 非受体酪氨酸激酶Ｓｒｃ激酶家族有１３种，在人 基因组中由Ｂｌｋ、Ｂｒｋ、Ｆｇｒ、ＦＲＫ、Ｆｙｎ、Ｈｃｋ、Ｌｃｋ、Ｌｙｎ、 Ｓｒｃ、Ｓｒｍ和Ｙｅｓ共１１个成员组成＿５ Ｊ。近年多项研究 表明Ｓｒｃ激酶家族在多种信号转导通路中有关键性 作用，参与肿瘤细胞的增殖、分化、迁移、黏附和凋 亡，与肿瘤的发生、发展、转移及预后密切相关 Ｉ９ Ｊ。 近年研究发现ＦＲＫ在不同的肿瘤中扮演不同角色， 在肝癌和胰腺癌中ＦＲＫ高表达可促进癌细胞侵 袭 １ “Ｊ，在脑胶质瘤中ＦＲＫ抑制肿瘤的生 长＿ｌ 。本组发现ＦＲＫ中的Ｐ．ＦＲＫ在ＮＳＣＬＣ中 高表达，推测其在肺癌发生、发展中有重要作用。 随着对肿瘤研究的不断深入，许多与肿瘤预后 相关的Ｓｒｃ激酶家族也相继被发现。Ｒｏｓｅｗｅｉｒ等 ６＿ 报道Ｌｙｎ核表达的肾透明细胞癌患者预后不良，且 Ｌｙｎ可作为肾透明细胞癌患者预后评估的预测因 子。Ｗｉｎｄｉｓｃｈｈｏｆｅｒ等 发现Ｓｒｃ蛋白参与Ｇ（ａ１）／ Ｓｒｃ／￣２／４４／ＭＡＰＫ信号通路可诱导早期生长反应 因子一１（Ｅｇｒ．１）表达，促进骨肉瘤ＭＧ－６３细胞株的发 生、发展。于涓翰等 等实验结果显示Ｂｒｋ与Ｋｉ－ ６７的协同表达是促进ＮＳＣＬＣ进展的重要因素。目 前，已发现的Ｓｒｃ家族成员多数是癌基因，促进肿瘤 发生、发展。 ＦＲＫ是Ｓｒｃ家族激酶中的一员，Ｚｈｏｕ等¨ 发现 ＦＲＫ在人胶质瘤组织中的表达水平与其恶性程度 呈负相关，过表达ＦＲＫ可以抑制胶质瘤细胞的迁移 与侵袭能力。Ｙｉｍ等 报道ＦＲＫ有抑制乳腺癌细 胞生长的作用；但Ｃｈｅｎ等 。。发现ＦＲＫ是肝癌细胞 侵袭的正因子，促进肿瘤生长；提示在不同肿瘤 中ＦＲＫ所起的作用也不相同。目前，ｐ－ＦＲＫ与 ＮＳＣＬＣ的关系国内外尚无相关报道。本组结果显 示，ｐ－ＦＲＫ表达定位于ＮＳＣＬＣ肿瘤细胞细胞质而非 细胞核，ｐ－ＦＲＫ在远端对照组织中的表达水平远低 于其在ＮＳＣＬＣ组织中表达水平，ｐ－ＦＲＫ在肺腺癌中 的阳性率高于肺鳞癌。 淋巴结转移是肺癌患者重要的转移方式之一， 通常与患者的不良预后密切相关。本组结果发现， ・５２８・ 临床与实验病理学杂志Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２０１７ Ｍａｙ；３３（５） Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２００９，１５（４）：３０４—３１４． 淋巴结转移者ｐ－ＦＲＫ蛋白表达水平明显高于无淋 巴结转移者；本实验结果还发现，ＮＳＣＬＣ患者Ｐ— ＦＲＫ表达水平与患者ｐ－ＴＮＭ分期呈明显的正相关 （Ｐ＜０．０５），提示ｐ－ＦＲＫ阳性程度可能与ＮＳＣＬＣ患 者的不良预后相关。 ［６］ Ｗａｎｇ Ｒ，Ｌｉ Ｈ，Ｇｕｏ Ｘ，ｅｔ ａ１．ＩＧＦ－Ｉ ｉｎｄｕｃｅｓ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ－ｔｏ—ｍｅｓｅｎ— ｃｈｙｍａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｖｉａ ｔｈｅ ＩＧＦ－－ＩＲ・・Ｓｒｃ－－ＭｉｃｒｏＲＮＡ－－３０ａ・・Ｅ－－Ｃａｄｈｅｒｉｎ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｌ Ｒｅｓ，２０１６， ２４（４）：２２５—２３１． ［７］ Ｍｅｎｇ Ｙ，Ｓｈｕｋｌａ Ｄ，Ｐａｎｄｅ Ｖ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｐａｔｈ ｔｈｅｏｒｙ ａ－ 本组中ｐ－ＦＲＫ阳性程度与ＮＳＣＬＣ患者生存周 期明显相关。ｐ－ＦＲＫ阴性组的中位生存期及５年生 存率均高于阳性组，推测在ＮＳＣＬＣ发生、发展中Ｐ－ ＦＲＫ可能起重要作用，但其机制尚需进一步分析。 Ｃｏｘ回归单因素分析发现，ｐ－ＦＲＫ表达、淋巴结转 ｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｃ—Ｓｒｃ ｋｉｎａｓｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ， ２０１６，１１３（３３）：９１９３—９１９８． ［８］Ｗａｎｇ Ｙ Ｄ，Ｂａｏ ｘ Ｑ，Ｘｕ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ａ ｎｏｖｅｌ ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ｄｒｕｇ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｗｉｔｈ ｐｏｔｅｎｔ ａｎｔｉ—ｎｅｕｍｉｎｎａｍｍａｔｏｆｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ Ｓｒｃ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ，２０１６，５９（１９）：９０６２ ９０７９． 移、ｐ－ＴＮＭ分期均对ＮＳＣＬＣ患者术后生存率影响显 著，提示ｐ－ＦＲＫ表达可能作为ＮＳＣＬＣ患者预后的 影响因素。将淋巴结转移、ｐ－ＴＮＭ分期、ｐ－ＦＲＫ表 达水平均纳入Ｃｏｘ回归模型进行多因素统计分析， 结果发现ｐ－ＦＲＫ表达（Ｐ＜０．０１）是ＮＳＣＬＣ患者预 ［９ Ｊ Ｍｉｌａ Ｄ，Ｃａｌｄｅｒｏｎ Ａ，Ｂａｌｄｗｉｎ Ａ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ａｓｙｍｍｅｔｉｒｃ Ｗｎｔ ｐａｔｈ— ｗａｙ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｓ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ—ｌｉｋｅ ｄｉｖｉｓｉｏｎｓ ｖｉａ ｔｈｅ ｎｏｎｒｅｃｅｐｔｏｒ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ＦＲＫ一１ ｉｎ ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ［Ｊ］．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ， ２０１５，２０１（３）：１０４７—１０６０． ［１０］Ｃｈｅｎ Ｊ Ｓ，Ｈｕｎｇ Ｗ Ｓ，Ｃｈａｎ Ｈ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ｉｎ ｓｉｌｉｃｏ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｆｙｎ・・ｒｅｌａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ ｉｎ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏ－－ 后的影响因素，提示ｐ－ＦＲＫ可能成为判断 ＮＳＣＬＣ患者不良预后的标志物之一。 综上所述，ｐ－ＦＲＫ在ＮＳＣＬＣ中的表达水平明显 ｕｌａ［Ｊ］．Ｂｉｏｉｎｆｏｍａｔｒｉｃｓ，２０１３，２９（４）：４２０—４２７． ［１１］Ｊｅ Ｄ Ｗ，Ｏ Ｙ Ｍ，Ｊｉ Ｙ Ｇ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＳＲＣ ｆａｍｉｌｙ ｋｉ— ｎａｓｅ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｍｉｇｒａｔｉｏｎ， ａｎｄ ｉｎｖａｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｐａｎｃｒｅａｓ，２０１４，４３（５）：７６８—７７６． ［１２］Ｚｈｏｕ Ｘ，Ｈｕａ Ｌ，Ｚｈａｎｇ Ｗ，ｅｔ ａ１．ＦＲＫ ｃｏｎｔｒｏｌｓ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎ． ｖａｓｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｇｌｉｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ＪＮＫ／ｃ－Ｊｕｎｓｉｇｎａｌｉｎｇ 升高，且阳性程度与淋巴结转移及生存周期有明显 的相关性，表明ｐ－ＦＲＫ可作为ＮＳＣＬＣ患者不良预 后的预测因子，且有望成为肺癌病理诊断中新 ｌ Ｊｊ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｏｎｃｏｌ，２０１２，１１０（１）：９—１９． 的分子标志物。但是ＮＳＣＬＣ的发生、发展是多种因 素共同产生的结果，ｐ－ＦＲＫ在ＮＳＣＬＣ的发生及转移 中的生物学机制仍需进一步探讨。 参考文献： 陈万青，郑荣寿，张思维，等．２０１２年中国恶性肿瘤发病和死 亡分析［Ｊ］．中国肿瘤，２０１６，２５（１）：１—８． ａｖｉｓ Ｗ Ｄ，Ｂｒａｍｂｉｌｌａ Ｅ，Ｒｉｅｌｙ Ｇ Ｊ．Ｎｅｗ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ ｃｌａｓｓｉｆｌｃａ． ［２］ Ｔｒｔｉｏｎ ｏｆ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ：ｒｅｌｅｖａｎｃｅ ｆｏｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｒａｃｔｉｃｅ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉ． ［１３］Ｓｈｉ Ｑ，Ｓｏｎｇ Ｘ，Ｗａｎｇ Ｊ，ｅｔ ａ１．ＦＲＫ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｖａ— ｓｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｇｌｉｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ Ｎ－－ｃａｄｈｅｒｉｎ／￣－・ｃａｔｅｎｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘ ｆｏｍｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ Ｍｏｌ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，２０１５，５５（１）：３２—４１． ［】４］Ｃｈｅｎ Ｂ，ＺｈａｎｇＷ，Ｇａｏ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｉｂｏｓｏｍａｌ ｐｒｏ， ｔｅｉｎ Ｓ６ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｎｏｎ—ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｂｙ ｉｎｄｕ． ｃｉｎｇ ｃｅｌｌｃｙｃｌｅ ａｒｒｅｓｔ，ｒａｔｈｅｒ ｔｈａｎ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ， ２０１４，３５４（２）：３７８—３８９． ［１５］王志维，雷珍牛，林辉，等．１１９例非小细胞肺癌中ＣＣＲ９的 表达及其预后分析［Ｊ］．临床与实验病理学杂志，２０１５，３１ （７）：７６４—７６８． ａ１ｓ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ，２０１３，３ｌ（８）：９９２—１００１ ［３］ Ｓｉｅｇｅｌ Ｒ，Ｎａｉｓｈａｄｈａｍ Ｄ，Ｊｅｍａｌ Ａ．Ｃａｎｃｅｒ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ『Ｊ］．ＣＡ Ｃａｎｃｅｒ Ｊ Ｃｌｉｎ，２０１３，６３（１）：１１—３０． ［１６］Ｒｏｓｅｗｅｉｒ Ａ Ｋ，Ｑａｙｙｕｍ Ｔ，Ｌｉｍ Ｚ，ｅｔ ａ１．Ｎｕｃｌｅａｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｌｙｎ，ａ Ｓｒｃ ｆａｍｉｌｙ ｋｉｎａｓｅ ｍｅｍｂｅｒ．ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｐｏｏｒ ｐｒｏｇｎｏ— ｓｉｓ ｉｎ ｒｅｎａｌ ｃａｎｃｅｒｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．ＢＭＣ Ｃａｎｃｅｒ，２０１６，１６：２２９． ．［４］ Ｓｅｎｄａ Ｙ，Ｍｕｒａｔａ—Ｋａｍｉｙａ Ｎ．Ｈａｔａｋｅｙａｍａ ＭＣ—ｔｅｒｍｉｎａｌ Ｓｒｃ ｋｉ． １ １７］Ｗｉｎｄｉｓｃｈｈｏｆｅｒ Ｗ，Ｈｕｂｅｒ Ｅ，Ｒｏｓｓｍａｎｎ Ｃ，ｅｔ ａ１．ＬＰＡ．ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｅｒｉｏｓｔｉｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｎａｓｅ—ｍｅｄｉａｔｅｄ ＥＰＩＹＡ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒａｇｍｉｎ ｃｒｅａｔｅｓ ａ ｆｅｅｄ． ｆｏｒｗａｒｄ Ｃ—ｔｅｒｍｉｎａｌ Ｓｒｃｋｉｎａｓｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｌｏｏｐ ｔｈａｔ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｃｅ１１ ｍ０． ｔｈｅ ＬＰＡ（１）／Ｅｇｒ－ｌ ａｘｉｓ［Ｊ］．ＢＭＣ Ｃａｎｃｅｒ，２０１２，９４（９）：１９９７ ｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｓｃｉ，２０１６，１０７（７）：９７２—９８０． ［５］ Ｙｉｍ Ｅ Ｋ，Ｐｅｎｇ Ｇ，Ｄａｉ Ｈ，ｅｔ ａ１Ｒａｋ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ａｓ ａ ｔｕｍｏｒ ｓｕｐ． ．２００５． ［１８］于涓翰，张勇，刘洋，等．Ｂｒｋ在非小细胞肺癌中的表达及 ｐｒｅｓｓｏｒ ｂｙ ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ＰＴＥＮ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｋｉ６７表达的关系［Ｊ］．解剖科学进展，２０１３，１９（１）：９—１２． Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐ－ＦＲＫ ａｎｄ ｉｔｓ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ ｎｏｎ・ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ＬＩ Ｌｉ ，ＫＯＵ Ｙｕ—ｌｉｎｇ ，ＣＨＥＮ Ｆｅｉ ，ＳＵＮ Ｘｉｎｇ—ｗａｎｇ （ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｔｈ。ｌｏｇｙ，Ａｆｉｌｆｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｓｏｕｔｈｗｅｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅ ｉｔｙ，Ｌｕｚｈｏ ６４６０００．Ｃｈｉｎ。： 。Ｌａｂ。ｒａｔｏｒｙ ｏｆＰａｔｈ０ｌｏｇｙ，Ｗｅｓｔ Ｃｈｉｎａ ＨｏｓｐｉｔａｌＳｉｃｈｕａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇ ，６１００４１，Ｃｈｉｎａ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ Ｐｕｒｐｏｓｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｐ— ａｎｄ ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｉｔｓ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｖａｌｕｅ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＦＲＫ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｎｏｎ—ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ（ＮＳＣＬＣ）ｐａｔｉｅｎｔｓ ｐ－ＦＲＫ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｔｕｍｏｒ ｔｉｓｓｕｅｓ ａｎｄ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｄｊａｃｅｎｔ 临床与实验病理学杂志Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２０１７ Ｍａｙ；３３（５） ・５２９・ 网络出版时间：２０１７—５—１７ ２３：５３ 网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｅｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０７３．Ｒ．２０１７０５１７．２３５２０１３．ｈｔｍ１ ．良性转移性平滑肌瘤６例临床病理分析 赵利敏 ，江若霞 ，李摘要：目的姗 ，桂秋萍 ，王志永 ，杨元元 探讨良性转移性平滑肌瘤（ｂｅｎｉｇｎ ｍｅｔａｓｔａｓｉｚｉｎｇ ｌｅｉｏｍｙｏｍａ，ＢＭＬ）的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法 收 集６例ＢＭＬ患者的临床病理资料，采用ＨＥ及免疫组化ＥｎＶｉｓｉｏｎ法染色进行组织学观察。结果６例患者均为女性，年龄 ３３～６５岁，均有子宫肌瘤手术史；５例为肺转移，其中伴腹壁转移、伴脊柱转移各１例，另１例为腹股沟转移；镜下为梭形细胞 肿瘤，部分病例富于细胞，细胞异型性小，未见明显核象及坏死。免疫表型：ＳＭＡ、ｓＭ—ＭＨＣ、ｄｅｓｍｉｎ，ｖｉｍｅｎｔｉｎ，ＥＲ、ＰＲ均阳 性，Ｓ－１００、ＣＤｌｌ７、ＣＤ３４均阴性，Ｋｊ一６７增殖指数均小于５％；随访患者３例带瘤生存、３例无瘤生存，分别随访１８、２８、４Ｏ、３ｌ、３６、 ８０个月。结论ＢＭＬ多发于子宫平滑肌瘤手术史的女性患者，肺是其常见转移部位，常同时伴其它部位的转移，病情进展较 缓慢，大多数患者生存期较长。 关键词：子宫平滑肌瘤；转移；临床病理；鉴别诊断；组织来源 中图分类号：Ｒ ７３７．３３ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１—７３９９（２０１７）０５—０５２９—０５ ｄｏｉ：１０．１３３１５／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｃｅｐ．２０１７．０５．０１３ 良性转移性平滑肌瘤（ｂｅｎｉｇｎ ｍｅｔａｓｔａｓｉｚｉｎｇ ｌｅｉｏ— ｍｙｏｍａ，ＢＭＬ）是子宫外出现的以良性形态为特征 的平滑肌瘤，常有子宫平滑肌瘤或子宫平滑肌瘤手 术史，多发于育龄期女性。文献报道以肺脏转移多 医师的诊断、治疗及判断预后等提供参考。 １材料与方法 １．１材料收集２００８～２０１５年总医院病理 见，还可出现皮肤、淋巴结、脊柱、肌肉组织、心脏等 部位的转移¨Ｊ。目前有关其发病机制及生物学行 为仍存在争议，文献报道多以个案为主，本文现收集 科诊断的６例ＢＭＬ临床资料及手术标本，对其进行 复查，包括患者年龄、性别、病史、临床表现、影像学 特征、转移部位、治疗及随访。 总医院病理科诊断的６例ＢＭＬ，结合临床病 理特征、鉴别诊断及治疗等进行分析，为临床和病理 接受Ｅｔ期：２０１７—０３—１６ 作者单位：。郑州市第一人民医院病理科４５０００４ ４５１１９１ １．２方法标本采用１０％中性固定，常规 脱水，石蜡包埋，４ ｍ厚切片，ＨＥ染色，光镜观察。 免疫组化采用ＥｎＶｉｓｉｏｎ法，一抗ＥＲ、ＰＲ、Ｋｉ－６７、ｖｉｍ－ ｅｎｔｉｎ、ｄｅｓｍｉｎ、ＳＭＡ、Ｓ．１００、ＣＤ１１７、ＳＭ．ＭＨＣ、ＣＤ３４均 购自北京中杉金桥公司。所用抗体均为工作浓度，具 体操作步骤按试剂盒说明书进行。用已知阳性病例 作为阳性对照，阴性对照用ＰＢＳ代替一抗。 １．３结果判定ＥＲ、ＰＲ、Ｋｉ一６７表达定位于细胞核， 呈棕黄色颗粒状；ＳＭＡ、ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ｄｅｓｍｉｎ、ｓ－１００、 ＣＤ１ １７、ＳＭ．ＭＨＣ、ＣＤ３４表达均定位于细胞质，呈棕 河南医学高等专科学校医学系，郑州河南中医药大学病理学与病理生理学教研室，郑州 ４５００１６ 总医院病理科，北京１００８５３ 作者简介：赵利敏，女，硕士，主治医师。Ｅ—ｍａｉｌ：ｙ１００１０４００２＠１２６ ｎｏｒｍａｌ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｔｉｓｓｕｅｓ ｆｒｏｍ １６２ ＮＳＣＬＣ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ＥｎＶｉｓｉｏｎ ｔｗｏ—ｓｔｅｐ．Ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ａｍｏｎｇ ｐ－ＦＲＫ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｇｅ，ｇｅｎｄｅｒ，ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ ｆｅａ— ｔｕｒｅｓ，ｐＴＮＭ ｓｔａｇｅ ａｎｄ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ＮＳＣＬＣ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗａｓ ａｌｓｏ ａｎａｌｙｚｅｄ．ｗｈｅｔｈｅｒ ｐ－ＦＲＫ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｕｓｅｄ ａｓ ａｎ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｐｒｅ－ ０．０５）．Ｋａｐｌａｎ—Ｍｅｉｅｒ ｓｕｒｖｉｖａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ａ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｐ－ＦＲＫ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ａｎｄ ｐｏｓｔｏｐｅｒａ— ｔｉｖｅ ｏｖｅｒａｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ（ｘ ＝１７．８４９，Ｐ＜０．００１）．Ｍｕｌｔｉｖａｒｉａｔｅ ａ— ｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｐ－ＦＲＫ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｗａｓ ａｎ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｐｒｏｇ－ ｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｆｏｒ ｏｖｅｒａｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ ＮＳＣＬＣ ｐａｔｉｅｎｔｓ（ＨＲ＝ ｄｉｃｔｏｒ ｏｆ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｆｏｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ＮＳＣＬＣ ｗａｓ ｆｕｒｔｈｅｒ ｄｅｔｅｒ— ｍｉｎｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｐ－ＦＲＫ ｉｎ ０．４９６，９５％ＣＩ：０．２９５－０．８３６，Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ａｓ ａ ｎｏｖｅｌ ＮＳＣＬＣ ｂｉｏｍａｒｋｅｒ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐ－ＦＲＫ ｍａｙ ｐｒｅｄｉｃｔ ａ ｐｏｏｒ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ＮＳＣＬＣ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｌｕｎｇ ｎｅｏｐｌａｓｍ；ｎｏｎ—ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ；Ｓｒｃ ｋｉ— ＮＳＣＬＣ ｔｉｓｓｕｅｓ（５１．９％）ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ａｄｊａｃｅｎｔ ｎｏｒｍａｌ ｌｕｎｇ ｔｉｓｓｕｅｓ（１１．７％）（Ｐ＝０．００１）．Ｔｈｅ ｅｘ－ ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐ－ＦＲＫ ｉｎ ＮＳＣＬＣ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｎａｓｅ ｆａｍｉｌｙ；ｐ－ＦＲＫ；ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ ｔｙｐｅ，ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ ｓｔａｔｕｓ ａｎｄ ｐＴＮＭ ｓｔａｇｅ（Ｐ＜
