茶多酚的含量测定

茶 多 酚 的 含 量 测 定

高锰酸钾直接滴定法

目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作 原理

茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的状况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶 多酚物质。依据耗费 1mL 0.318g/mL 含量。

的高锰酸钾相当于

5.82mg

茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的

仪器与试剂

仪器：剖析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、 试剂：

1 、 0.1% 靛红溶液：称取靛红 1g 加入少许水搅匀后，再慢慢加入相对密度为 却后用蒸馏水定容至 1000mL ，假如靛红不纯，可下法磺化办理是：称取靛红 80 ℃烘箱或水浴中加热磺化

4~6h ，用蒸馏水定容至

1.84 的浓硫酸 50mL ，冷 1g ，加浓硫酸 50mL ，在

500mL 白瓷皿。

1000mL ，过滤后贮于棕色瓶中。

2 、 0.630%草酸溶液：正确称取草酸 6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至 1000mL。

3、高锰酸钾标准溶液：称取 AR的高锰酸钾 1.27g，用蒸馏水溶解后定容至 1000mL 。正确汲取 0.630%草酸溶液 10mL，放入 250ml 锥形瓶中（平行 3 份），加入蒸馏水 50mL，再加入相对密度为 1.84 的浓硫酸 10mL，摇匀，在 70~80℃水浴中保温 5 分钟，拿出后用高锰酸钾进行滴定。开始慢滴，待红色消逝后再滴第二滴，此后可渐渐加速，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持 1 分钟不变即为终点。计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。

测定步骤

1、供测试液的准备： 正确称取茶叶磨碎样品 1g，放在 250mL 锥形瓶中，加入沸蒸馏水 80mL， 在开水浴中浸提 30 分钟，而后抽滤、清洗，滤液倒入 100mL 容量瓶中，冷至室温，最后用 蒸馏水定容至 100mL，摇匀。 2、测定：取 200ml 蒸馏水放入白瓷皿中，加入 0.1%靛红溶液5mL，

再加入供测试液 5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴 定速度以 1 滴/s 为宜， 靠近终点时应慢滴。 直到溶液由深蓝色转变成亮黄色为止， 的高锰酸钾毫升数。同时做空白测定。 五、结果计算

式中： X—茶多酚的含量， % ， B—空白耗费的高锰酸钾毫升数， mL ， V2--供测试液的体积， mL

记下耗费

mL A—样品耗费的高锰酸

钾毫升数， mL ω --高锰酸钾的浓度， % ，m—样品的质量 g，V1—测定用供测试液的体积，

酒石酸铁比色法

原理：

茶多酚的含量测定

茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的 20％～ 35％，由约 30 种以上的酚类物质所构成，通称茶

多酚。按其化学构造分为四类： （ 1）儿茶素类，属黄烷醇类； （2）黄酮及黄酮醇类； （ 3）花

白素及花青素，即羟基 -［ 4］ -黄烷醇及其钾盐； （ 4）醋酸及缩酚酸类。此中以黄烷醇类化 合物最重要（占多酚的 80％左右）。纯儿茶素一般为白色无定形粉末，在空气中极易氧化成棕色物，能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂中。茶多酚能溶于水、乙醇、

甲醇、丙酮、乙酸乙酯， 微溶于油脂。 对热、酸较稳固， 2%的溶液加热至 120 ℃并保持 30min，无显然变化。在碱性条件下易氧化变质。

酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色络合物，络合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含 量 成 正 比。所以能够用比色方法测定。该法可防止高锰酸钾滴定法所产生的人为视觉偏差 。

茶多酚的测定方法有高锰酸钾直接滴定法和酒石酸铁比色法， 因为高锰酸钾直接滴定法操作比较复杂， 且靠肉眼察看颜色判断终点， 假如样品溶液颜色较深时，可能影响测定结果。本实验将应用酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量。

仪器与试剂

仪器：分光光度计

试剂：（ 1）酒石酸铁溶液： 称取 FeSO4·7H2O 1.000g，含 4 个结晶水的酒石酸钾钠 5.00gNaH2PO4 ·2H2O，加蒸馏水溶解后．用蒸馏水稀释至 1000mL．

5.000g ，

加蒸馏水溶解后， 用蒸馏水稀释至 1000mL （ 2）pH7.5 的磷酸缓冲液： 60.2g Na2HPO4·12H2O ，

步骤

（l ）样品溶液的制备方法： 正确称取茶叶磨碎样品 1g 于 200mL 三角烧瓶中，加入开水 80mL，在开水浴中浸提 30min ，而后过滤、清洗，滤液倒人 100mL 容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至刻度，摇匀，备用。

摇匀，再加入 pH7.5 磷酸缓冲液稀释至刻度。 以蒸馏水取代样品溶液加入相同的试剂作空白。 选择 540nm 波长和 1cm 的比色杯测定吸光度。

计算

式中：ω—茶多酚的含量， 中茶多酚的浓度为

%，A—样品溶液的吸光度值， T—样品溶液的整体积， mL V—测

定用样品溶液的量， mL，m—样质量量， g 3.913—用 1cm 比色杯，当吸光度为

3.913mg/mL

1.0 时，试液

说明及注意事项

1、、磷酸盐缓冲液在常温下简单生长霉菌，放冰箱中保留或临用时现配。 2、样品溶液制备中的注意事项：

（1）较透明的样液，假如味茶饮料，将样液充足摇匀后，直接取样测定

茶多酚的含量测定

（2）较污浊的样液，假如汁茶饮料、奶茶饮料等，称取充足混匀的样液 25mL 于瓶中，50mL 容量 加 95%的乙醇 15mL 充足混匀，搁置 15min ，用水定容至刻度，过滤。

（3）含有碳酸气的样液，如农民汽茶，量取充足混匀的样液 取其总量，于电炉上加热至沸，在微沸状态下加热 补足本来的质量，摇匀，备用。

100mL 于 250mL 的烧杯中，称

10min ，以将二氧化碳清除，放冷，用水

测定

正确汲取试液 1 ml ，注人 2 5 m L 的容量瓶中， 加水 4 ml 和酒石酸亚铁溶液 再加 p H 7 . 5 磷酸盐缓冲液至刻度，用 作参比，测定吸光度 ( A)

10mm 比色杯，在波长

5 ml ，充足混淆，

540nm 处，以试剂空白溶液

高效液相色谱

器为紫外检测器、检测波长

采纳高效液相色谱法测定绿茶中茶多酚的含量。在色谱柱为 KromasilC18 、流动相为乙酸：

甲醇： N,N- 二甲基甲酰胺：水 =1：1：40：58（V/V ）、色谱柱温 30℃、进样量 10μL、检测

280.0nm 的色谱条件下对绿茶中茶多酚含量进行测定

。