广药药理实验中枢神经兴奋药LD50实验报告

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药理学实验论文

中枢神经系统兴奋药对小鼠急性毒性研究

二级学院 专 业 班 级 学生姓名 学 号 指导教师

药科学院

2015年12月

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中枢神经系统兴奋药对小鼠急性毒性研究

摘要：从未知药物筛选出具有中枢神经兴奋作用的目标药物，通过给药注

射，观察药物对小鼠的兴奋作用，测定其LD50，以评价该药物的有效性和安全性。方法：预实验：取三只小鼠，腹腔注射母液，筛选出目标药物，再将15只小鼠随机分为5组，测定LD0和LD100。正式实验：将50只小鼠随机分成5组，按计算的剂量注射稀释好的药物，观察小鼠死亡情况，以测定LD50。

关键词：LD50；中枢兴奋药

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目录

1 前言 ......................................................................................................... 1 2 材料与方法 ............................................................................................ 2

2.1 实验材料 ..................................................................................................... .....2 2.2 实验方法........................................................................................................3 2.2.1预实验.............................................................................................................3 2.2.2正式实验.........................................................................................................4 2.3 数据处理方法.................................................................................. ................4

3 实验结果................................................................................................................5 4结论 .......................................................................................................... 5 参考文献 .................................................................................................... 6

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1 前言

作用于中枢神经系统的药物主要影响递质和受体而发挥作用，而其药理效应主要表现是中枢神经系统功能的增强或抑制；通过观察动物的药物反应，可初步区分动物的特性。通过药物LD50的测定，分析其安全性。

药物给药剂量与动物死亡率呈正态分布。以对数剂量为横坐标，累加死亡率为纵坐标作图，可得到一对称S型曲线，其两端较平坦，中间较陡，说明两端处剂量稍有变化时死亡率的改变不易表现出来，在50%死亡率处斜率最大，该处剂量稍有变动时，其死亡率变动最明显，即最灵敏，在技术上也最容易准确测得，故常选用LD50值作为反映药物毒性的指标。若将死亡率换算成几率单位，则对数剂量与几率单位呈直线关系，用数学方法可拟合其回归方程式，可精确地计算LD50及引起任何死亡率的剂量及相关数据。

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2 材料与方法

2.1 实验材料

动物： 动物名称：小鼠 体重范围：18~26g

动物来源：广东药学院实验动物中心 药品与试剂：

名称：中枢神经系统药物、生理盐水 来源：广东药学院药科学院药理系

2.2 实验方法 2.2.1 预实验

确定实验药物，大致探索该药物的LD100和LD0,以便正式实验时确定剂量。

实验过程：

1、确认主题，准备预实验方案，并在课前做方案汇报与探讨可能出现、需要注意的问题。

2、称量所取的18只小鼠，记录其体重。

3、从18只小鼠中随机抽取3只小鼠，按0.1ml/10g的给药量分别注射实验提供的三瓶母液，筛选出目标药物中枢兴奋药。

4、将剩余小鼠分为5组，每组3只，进行药物兴奋致死量研究。根据小鼠体重以0.1ml/10g的剂量注射，以母液浓度为100%，初定了20%、40%、60%、80%、100%的五组不同浓度兴奋药。为避免所设置的最低浓度过高，从最低浓度开始试验，依次提高注射药物浓度，并根据实际情况调整浓度（如若在40%浓度小鼠全部死亡，则根据实际情况从新调整注射浓度）。在30分钟内观察小鼠的反应并记录死

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亡情况。

5、通过实验现象的观察，得出了我们组中枢兴奋药的LD0和LD100的所在范围。

2.2.2 正式实验

按照实验方案进行完成所选药物的LD50测定 实验剂量计算：r=(Dmin/Dmax)^(1/(n-1))

根据预实验结果和正式实验剂量组数设计，计算出正式实验的剂量公比r为0.87,则各组剂量为： 1）262.5mg/kg

2) 262.5*0.87=228.38mg/kg 3) 262.5*0.87^2=198.6mg/kg 4) 262.5*0.87^3=172.86mg/kg 5)262.5*0.87^4=150.39mg/kg

实验过程：

1、取小鼠50只，称重，标记，随机分为5组，每组10只，进行下一步实验； 2、各组小鼠按0.1ml/10g给药量分别腹腔注射相应浓度药液，立即记录时间，观察小鼠情况，并在30分钟后记录各组死亡数量。 3、根据实验所得数据，计算LD50

2.3数据处理方法

实验结果将小鼠死亡情况，药物浓度等输入LD50数据处理程序,即可求得回归方程与LD50

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3 结果

表1 预实验筛选药物情况

组别 1 2 3 编号 1 2 3 现象 小鼠无任何异常 小鼠跳动，呼吸加快，最后死亡 小鼠安静，嗜睡，最后死亡 药物 生理盐水 兴奋药 抑制药

表2 预实验实验结果

组别 1 2 3 4 5

表 3 正式实验实验结果

组别 剂量 1 2 3 4 5

表4 中枢实验药LD50测定

262.5 228.38 198.69 172.86 150.39 现象 小鼠跳动，呼吸加快，最后死亡 小鼠跳动，呼吸加快，最后部分死亡 小鼠跳动，呼吸加快，最后部分死亡 小鼠跳动，呼吸加快 小鼠跳动，呼吸加快 剂量(mg/kg) 现象 600 450 375 262.5 150 小鼠兴奋，惊厥，最后死亡 小鼠兴奋，惊厥，最后死亡 小鼠兴奋，惊厥，最后死亡 小鼠兴奋，惊厥，最后死亡 小鼠跳动，呼吸加快 死亡率 100% 100% 100% 100% 0% 死亡率 100% 30% 40% 0% 0% 组别 1 2 3 4 5

剂量（mg/kg） 262.5 228.38 198.69 172.86 150.39

对数剂量（X） 2.419 2.359 2.298 2.238 2.177

动物数（只） 10 10 10 10 10

死亡动物数（只）

10 3 4 0 4 0

死亡率

（%） 100 30 40 0 0

几率单位（Y） 33.000 4.480 4.750 0.003 0.003

及95%可信度 =185.6062mg/kg 95%可信度：

4结论

预实验中测得引起死亡的最大无效量为150mg/kg,最小有效量为262.5mg/kg。 正式实验后求得该中枢神经系统抑制药的LD50为185.6115mg/kg。

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参考文献

[1] 黄胜炎 作用于中枢神经系统药物新制剂 上海医药 2008年09期 （第

31-33页）

[2] 谭毓治 药理学实验 人民卫生出版社 广州 2008年12月 （第-90 136-137页） 6