谷红对抵抗大鼠脑缺血能力影响的研究

中国实用内科杂志２００６年ｌＯ月第２６卷第２Ｏ期　・１６２７・　谷红对抵抗大鼠脑缺血能力影响的研究　徐蔚海　，崔丽英　，左萍萍　，董毅龙　，郝文宇　，杨楠　【摘要】　目的研究谷红对脑组织抵抗脑缺血能力的影响。方法２００６年１月至５月取中国医学科学院北　京协和医院制作的ＳＤ大鼠左侧大脑中动脉线拴模型，比较经谷红腹腔注射和无此干预的氯化一２３５三苯基四　氮唑（１Ｔｒｃ）染色所示的梗死体积差异。利用免疫组化的方法观察凋亡蛋白ｃｓｅａｐａｓｅ３在不同动物组中梗死侧　皮层区域的表达状况。结果在的机制之一。　谷红腹腔注射可以显著减少大鼠脑组织的梗死体积（Ｐ＜０．０５），ｃａｓｅｐａｓｅ３在谷　红组的表达与模型组相比明显下降。结论谷红可以增强大鼠抵抗急性脑缺血的能力，抗凋亡作用有可能是潜　【关键词】　大鼠脑梗死；谷红；凋亡蛋白　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｇｕｈｏｎｇ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｂｒａｉｎ　ｔｏ　ｒｅｓｉｓｔ　ｉｓｃｈｅｍｉａ．Ｘｕｎ　Ｗｅｉｈａｉ’，Ｃｕｉ　，Ｚｕｏ　Ｐｉｎｇｐｉｎｇ，　ｅｔ　ａ１．　Ｐｅｋｉｎｇ　Ｕｎｉｏｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ　Ｉｎｔｅｒｎａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ￣ｉｊｉｎｇ　１００００１，Ｃｈｉａ　ｎＡｂｓｔｒａｃｔ　０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｗｅ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｇｕｈｏｎｇ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｂｒａｉｎ　ｔｏ　ｒｅｓｉｓｔ　ｉｓｃｈｅｍｉａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＭＣＡＯ　ｍｏｄｅｌ　Ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｉｎ　ＳＤ　ｒａｔｓ　ＴＩ　Ｃ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ＷａＳ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｉｎ　Ｇｕｈｏｎｇ　ｇｒｏｕｐ　ｗｉｔｈ　ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｏｕｔｉｎｅ　ＭＣＡＯ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ　ｖｏｌｕｍｅ　ｗａｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ．Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　Ｃａｓｐａｓｅ　３　ｅｘ—　ｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｐｅｒｉ—ｉｎｆａｒｃｔ　ｃｏｒｔｉｃｅ　ｏｆ　ｂｏｔｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｇｒｏｕｐｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｇｕｈｏｎｇ　ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｔｈｅ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ　ｖｏｌｕｍｅ（Ｐ＜０．０５）．Ｃａｓｐａｓｅ　３　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｗａｓ　ｌｏｗｅｒ　ｉｎ　Ｇｕｈｏｎｇ　ｒｏｕｐ　ｇａｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ．　Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｇｕｈｏｎｇ　ｍａｙ　ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｂｒａｉｎ　ｔｏ　ｒｅｓｉｓｔ　ｉｓｃｈｅｍｉａ、Ａｎｔｉ—ａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ｇｕｈｏｎｇ　ｍａｙ　ｂｅ　ｔｈｅ　ｏｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｕｎｄｅｄｉｅｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ、　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ　Ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ；Ｇｕｈｏｎｇ；Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｐｒｏｔｅｉｎ　红花提取液长期以来在国内被用作缺血性脑血管病的　治疗药物，其主要成分是红花黄色素Ａ。研究提示，红花　可能具有抗氧化和清除自由基、抗血小板、抗凝、保护血　型中培养的谷红海马神经元胶质细胞具有明显的抗凋亡作　用。其存活率明显高于无谷红干预的３一ＮＰ模型对照组。　因此，我们于２００６年１月至５月在试验中观察缺血一凋　亡途径在谷红干预下的变化情况。　１材料与方法　管内皮的多种作用　。在临床实践中，红花的安全性基　本得到认可。乙酰谷酰胺是一种神经肽，它可以透过血脑　屏障，加强细胞内谷光甘肽合成，从而具有潜在的抗氧化　损伤的功能。谷红是红花和乙酰谷酰胺的混合物，根据这　两种成分的特性，我们推测谷红有可能具有提高脑组织抵　抗脑缺血的能力。本实验拟在大鼠大脑中动脉线拴模型中　验证这一设想。　在近来的脑缺血理论中，细胞凋亡机制越来越引起研　究者的注意。在缺血核　Ｌ－坏死以外的区域，大量的细胞将　出现迟发型死亡，凋亡机制起到极为重要的作用　。我　们的前期试验表明，３一硝基丙酸（３一ＮＰ）化学缺氧模　作者单位：１．中国医学科学院北京协和医院神经科，北京　１００００１；２．中国科学院基础所药理室，北京１００００１　通讯作者：崔丽英，Ｅ—ｍａｉｌ：ｐｕｍｃｈｃｌｙ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｎ．ＣＩ１　１．１药品及材料谷红注射液为乙酰谷酰胺和红花提取　物制成的灭菌水溶液。含红花红色素Ａ　０．６１　ｇ／Ｌ；乙酰谷　酰胺７９　ｇ／Ｌ（每ｍＬ含红花原材料约１　ｇ）。国药准字　Ｈ２２０２６５８２。本实验中的所有谷红溶液为一次性制备。兔　抗ｃａｓｐａｓｅ３抗体（美国Ｃｅｌｌ　Ｓｉｎａｌｇｉｎｇ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ公司产　品）；１Ｔｒｃ（美国Ｓｉｇｍａ公司产品）；ＡＢＣ试剂盒（北京中　衫金桥生物技术有限公司产品）；ＤＡＢ（北京中衫金桥生　物技术有限公司产品）；德国Ｌｙｃｒａ冰冻切片机；Ｏｌｙｍｐｕｓ　生物显微镜及照相机。　１．２动物和分组雄性ｓＤ大鼠４０只（由维通利华动物　中心购入），体重２００—２５０　ｇ。随机分为２组：大脑中动　脉线拴模型（ＭＣＡＯ）组和ＭＣＡＯ并谷红腹腔注射组，每　维普资讯 http://www.cqvip.com

・１６２８・　ＣＨＩＮＥＳＥ　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＰＲＡＣＴＩＣＡＬ　ＩＮＴＥＲＮＡＬ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　Ｏｃｔ　２００６　Ｖｄ．２６　Ｎｎ　２０　组２０只。　ＭＣＡＯ模型的制备采用改良的线拴法将ｓＤ大鼠制作　成左侧大脑中动脉阻断模型，在缺血１　ｈ后再将插线拔　除，大鼠在模型建立后第５天处死，其间给予精心饲养。　谷红组，于模型建立前第３天开始直至模型建立后第４天　２结果　５　ｄ后，大鼠的死亡比在模型组为９／２０，在谷红组的　死亡比为７／２０，差异无统计学意义。模型组的大鼠脑梗　死体积为（３３０．１±１６．８）ｔｏｎｉ　，谷红组脑梗死体积为　（２１８．６±２０．７）ｍｍ　，谷红组的脑梗死体积显著小于模型　组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。线栓模型组和谷红　治疗组均可见ｃａｓｐａｓｅ３蛋白阳性表达，主要位于细胞质。　进行腹腔注射谷红（１　ｍＬ／１００　ｇ），在模型建立后第５天　处死。该剂量是大鼠所承受的腹腔注射的最高剂量。剂量　选择是根据我们的体外试验结果：在安全范围内的谷红剂　量与其脑保护作用的关系为正相关。而腹腔注射的最高剂　量也在谷红的安全剂量范围之内。　本研究所有动物在中国医学科学院基础所动物房　（二级）饲养并完成实验，实验时间为２００６年１月至５　月。　１．３　ＴＹＣ染色戊巴比妥钠（５０　ｍｇ／ｋｇ）麻醉大鼠，于　冰盒上快速取脑并于一２０￣Ｃ冰冻１０　ｒａｉｎ后，连续冠状切　片，片厚２　ｍｍ。此后，用１％ＴＹＣ　３７℃染色１５　ｍｉｎ。照　相，并用４％多聚甲醛４￣Ｃ保存，图片收集，分析，计算　脑梗死体积　。　１．４免疫组化用戊巴比妥钠（５０ｍｇ／ｋｇ）麻醉大鼠，　经左心室快速灌注０．１　ｍｏＬ／Ｌ　ＰＢＳ约２００　ｍＬ，灌注４％多　聚甲醛约２００　ｍＬ，在冰盒上快速取脑，用４％多聚甲醛　４￣Ｃ固定４８　ｈ，在１５％ＰＢ蔗糖沉底，然后在２０％ＰＢ蔗糖　沉底、３０％ＰＢ蔗糖沉底，最后冰冻切片机冠状切片，片　厚１６　ｍ，于一２０℃保存。　以梗死侧皮层组织为研究对象。切片室温晾干后用蒸　馏水稍洗，于ＰＢＳ浸泡５　ｍｉｎ，放入３％Ｈ２Ｏ　孵育８　ｍｉｎ　以消除内源性过氧化物酶活性，再用ＰＢＳ洗，３　ｍｉｎ　Ｘ　３　次，利用正常山羊血清室温孵育３０ｒａｉｎ封闭。倾去，滴加　１：５０稀释的ｃａｓｐａｓｅ３一抗，适当比例稀释的一抗　（ｃａｓｐａｓｅ３　１：５０稀释），于４℃过夜。用ＰＢＳ洗３ｍｉｎ　Ｘ　３　次，加生物素标记山羊抗兔ＩｇＧ（ｃａｓｐａｓｅ３），于室温孵育　３０ｍｉｎ。再用ＰＢＳ洗３　ｍｉｎ　Ｘ３次。后用辣根酶标记链霉卵　白素，室温孵育３０ｒａｉｎ，再用ＰＢＳ洗３　ｍｉｎ×３次。利用　ＤＡＢ显色（镜下控制显色时间）后，用自来水充分冲洗，　再用蒸馏水洗，经苏木素轻度复染，再次自来水充分冲洗　和蒸馏水洗。梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封　片。镜下观察并拍照。以ＰＢＳ代替一抗作为阴性对照。　经不同浓度的乙醇孵育后（７０％乙醇５　ｓ，８０％乙醇５　ｓ。　９０％乙醇５　ｓ，９５％乙醇５　ｓ，１００％乙醇５　ｍｉｎ，１００％乙醇　５　ｍｉｎ）。利用二甲苯孵育１０　ｒａｉｎ后用中性树胶封片。　１．５结果判断阳性标准：细胞胞质有棕黄色颗粒着色：　阴性标准：细胞胞质无棕黄色颗粒着色。着色深浅表示阳　性强度。选择６张切片，每张切片于半暗带区随机挑选３　个高倍视野，计算每一视野下的阳性细胞数，对ｃａｓｐａｓｅ３　表达强度进行半定量分析。　１．６统计学处理实验结果以均数±标准差（互±ｓ）表　示，两组间比较采用ｔ检验，Ｐ＜０．０５视为差异有显著性。　但治疗组ｃａｓｐａｓｅ３阳性细胞数显著低于模型组，差异有统　计学意义（Ｐ＜０．０１）。模型组阳性细胞数每高倍视野　（７２．２８±３．ｏ７）个，治疗组阳性细胞数每高倍视野　（２８．７８±１．３４）个。　３讨论　脑缺血是一个复杂的、多种病理生理机制参与的过　程。现代的大量脑保护研究结果越来越倾向于将单一药效　机制的药物治疗方向摒弃，而转向综合的多机制兼顾的治　疗方案。正如结核、肿瘤一样，鸡尾酒式的、靶向于多种　病因机制的脑卒中治疗方案正在方兴未艾之中。中药是天　然的“鸡尾酒”，中药的药效是否确切以及中药的组分合　理性开发是重要的课题，即不能无限拔高，也不能置之不　顾。谷红是一种新开发的中西药“鸡尾酒”，从理论上而　言，它有可能结合了红花和乙酰谷酰胺的作用机制特点。　但在这些理论推测没有得到实验证据之前，最有意义的也　是最终的疗效分析还是要看是否能减少梗死体积。本研究　发现，谷红腹腔注射可以显著的减少线拴缺血后梗死体积　平均近１／３，这一结果使谷红的药效机制研究和药物治疗　途径优化的进一步研究的可行性建立起来。　脑组织在损伤性缺血以后，病理上分为核心区和半暗　带区。核心区的主要病理特点是细胞的坏死，它是不能逆　转的，也无从治疗。半暗带区细胞死亡的病理机制可以包　括坏死，但是更主要的是凋亡：细胞在缺血后启动了死亡　程序以后逐渐凋亡　。从治疗的意义讲，半暗带区的细　胞死亡和生存是一个动态的可以有所干预的区域，如果治　疗有效，则细胞存活；治疗失败，则细胞最终死亡，其中　大部分是凋亡的形式。　尽管抗凋亡治疗很早就被提出，最近仍一再于卒中实　验研究中被强调，但是并没有发现一个切实可用的治疗药　物　。在凋亡的瀑布中，尽管诸多因素可以施加影响，　如Ｂｃｌ一２、ＢＡＸ、ｃａｓｐａｓｅ　８等，但是ｃａｓｐａｓｅ　３是凋亡通　路中一个重要的共同效应分子，它的含量对凋亡的可逆与　否有着很重要的影响　Ｊ。　大脑中动脉线拴模型的核心区在基底节区，皮层是它　的半暗带区，我们因此选择这个模型来研究谷红对凋亡通　路中ｃａｓｐａｓｅ３的影响。基因的转录调节和最终翻译成功能　蛋白质并非完全一致，完成某个蛋白质表达的过程可能会　很复杂。我们因此直接将最后的功能蛋白质表达作为研究　的方向，我们这样的研究结果可能会更有实际意义。我们　维普资讯 http://www.cqvip.com

中国实用内科杂志２００６年ｌＯ月第２６卷第２Ｏ期　・１６２９・　同时还将线拴后大鼠的培养时间延长至第５天，因为在这　一重要指标出发，确切的证实了谷红具有增强大鼠抵抗脑缺　血的能力，这对谷红治疗脑卒中的进一步实验研究和临床　研究具有重要意义。　参考文献　［１］Ｚｈｕ　ＨＢ，Ｚｈａｎｇ　Ｌ，Ｗａｎｇ　ＺＨ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｈｙｄｒｏｘｙｓａｆｌｆｏｒ　ｙｅｌｌｏｗ　ａ　ｏｎ　ｆｏｃａｌ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｒａｔｓ　时间段内，凋亡机制可以尽可能的发挥作用，而在造模　后很快处死大鼠，有可能将坏死的作用高估而低估凋亡的　作用，造成偏倚。我们发现，在谷红干预注射后，　ｃａｓｐａｓｅ３的表达在半暗带区明显减少，提示凋亡过程被显　著抑制。这个结果和１ＴＩ’ｃ最后揭示的梗死灶结果在逻辑　上完全符合，提示谷红可能通过抗凋亡机制来减少梗死体　积。　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ［Ｊ］．Ｊ　Ａｓｉａｎ　Ｎａｔ　Ｐｒｏｄ　Ｒｅｓ，２００５，　７（４）：６０７—６１３．　本实验的不足在于药物注射在动物模型建立前（３　ｄ）　就开始，并持续到建立后（４　ｄ），因此不能确切判断谷红　预处理或后处理的不同效果。由于腹腔注射这一方法所致　药物达到脑组织的速度要比静脉持续泵入要慢，后者对实　验条件有一定的要求。而在“时间就是大脑”的脑卒中　［２］Ｗｅｉ　Ｘ，Ｌｉｕ　Ｈ，Ｓｕｎ　Ｘ，ｅｔ　ａ１．Ｈｙｄｒｏｘｙｓａｆｉｆｏｒ　ｙｅｌｌｏｗ　ａ　ｐｒｏｔｃｔｅｓ　ｒａｔ　ｂｒａｉｎｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｉｓｃｈｅｍｉａ・－ｒｏｐｅｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ｂｙ　ａｎｔ／ｏｘｉｄａｎｔ　ａｅ－　ｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ　Ｌｅｔｔ，２００５，３８６（１）：５８—６２．　［３］Ｓａｉｒａｎｅｎ　Ｔ，Ｋａｒｊａｌａｉｎｅｎ—Ｌｉｎｄｓｂｅｒｇ　ＭＬ，Ｐａｅｔａｕ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ａｐ－　ｏｐｔｏｓｉｓ　ｄｏｍｉｎａｎｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｅｒｉｉｎｆａｒｏｔ　ａｒｅａ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｉｓｃｈａｅｍｉｃ　治疗中，延迟升高的血药浓度有可能得出假阴性的结果。　所以，我们根据本实验室的实际情况，决定采用先期腹腔　注射的方法首先提高血药浓度的方法。未来的研究可以在　本试验的基础上进一步改善实验设计，明确谷红的药效发　ｓｔｏｒｋｅ—ａ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｔａｒｇｅｔ　ｏｆ　ａｎｔｉａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｂｒａｉｎ，　２００６，１２９（Ｐｔ　１）：１８９—９９．　［４］Ｆａｕｂｅｌ　Ｓ，Ｅｄｅｌｓｔｅｉｎ　ＣＬ，Ｃａｓｐａｓｅｓ　ａｓ　ｄｒｕｇ　ｔａｒｇｅｔｓ　ｉｎ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　Ｏｒ－　ｇａｎ　ｉｎｊｕｒｙ［Ｊ］．Ｃｕｒｔ　Ｄｒｕｇ　Ｔａｒｇｅｔｓ　Ｉｍｍｕｎｅ　Ｅｎｄｏｃｒ　Ｍｅｔａｂｏｌ　Ｄｉｓ－　ｏｒｄ，２００５，５（３）：２６９—２８７．　挥途径和时限。在复杂的中医药复方制剂的探索中，一次　性解决多数未知领域的研究是不可能完成的任务。本研究　结果，从减少梗死体积、抑制凋亡通路的决定性蛋白质的　｜　曩蹙＿镐－　玛　｜娩嵌瓶垮曩　２昏睫＿嗨一　冁鞋ｔ一曩　｜琏薯书目々　驽强　≮　零　囊　Ｉ　曩　　蠢罄慧毫｜誊誊一一　　强　薯　瓠毒薯　ｔ　誊。　％　普矗　聪　鼍誊　｝誊　＊　誊　ｂ■　誊｛骣弦《蕊ｒ　糖尿病肾病肿瘤坏死因子一ＯＬ基因表达与尿白蛋白排泄率的关系　ＪＵＡＮ　Ｆ．ＮＡＶＡＲＲＯ，ＦＲＡＮＣＩＳＣＯ　Ｊ．ＭＩＬＥＮＡ，ＣＡＲＭＥＮ　ＭＯＲＡ，ＣＡＮＤＥＬＡＲＩＡ　ＬＥ’ＯＮ，ＦＥＬＩＸ　ＣＬＡ－　ＶＥＲＩＥ，ＣＡＲＬＯＳ　ＦＬＯＲＥＳ，ａｎｄ　ＪＡＶＩＥＲ　ＧＡＲＣ’ＡＫｉｄｎｅｙ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｖｏ１．６８，Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ　９９，２００５，　９８一ｌＯ２．　背景：糖尿病肾病（ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ，ＤＮ）发生　结果：糖尿病组大鼠肾皮质ＴＮＦ—Ｏｔ的ｍＲＮＡ水平明　显升高且是非糖尿病对照组的２倍。与对照组相比，依那　和发展的致病机制和分子学事件并不完全清楚。近期研究　结果表明，糖尿病的炎症组分与糖尿病并发症相关。肿瘤　坏死因子（Ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）一　，一个具有主　要前炎症活性的细胞因子，是由肾脏细胞合成的。本文分　普利组几乎完全抑制了ＴＮＦ—Ｏｔ　ｍＲＮＡ的表达。ＵＡＥ与尿　ＴＮＦ—Ｏｔ水平（ｒ＝０．６８，Ｐ＜０．０５）和肾ＴＮＦ—Ｏｔ表达（ｒ　＝０．５１，Ｐ＜０．０５）密切相关。　析肾内，Ｉ’ＮＦ—　基因表达以及和尿白蛋白排泄率（ｕｒｉｎａｒｙ　ａｌｂｕｍｉｎ　ｅｘｃｒｅｔｉｏｎ，ＵＡＥ）二者间的关系，同时研究血管紧　张素转化酶抑制剂对ＴＮＦ—Ｏｔ表达和ＵＡＥ的影响情况。　方法：链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠，分为未接受治　结论：ＴＮＦ—Ｏｔ表达和ＵＡＥ在糖尿病肾病中增加。依　那普利抑制ＴＮＦ—Ｏｔ表达并且降低尿细胞因子和蛋白的分　泌。这些数据为ＤＮ的发病机制提供了新的认识，并进一　步证实了炎症机制在糖尿病肾脏损伤过程中发挥了重要作　用这一假说。　｜川。¨　薯　∞镪警：霸搬＊矗　∞　强弧　雏　毪再　毒誊｝々∞　弧∞　‘　蕾璺蕾　疗组和使用血管紧张素转化酶抑制剂（依那普利）组。８　周后，ＲＴ—ＰＣＲ（ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ　ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ）检　测肾脏ＴＮＦ—Ｏｔ表达。　§　§§ｌ　ｌ　囊　｝　强｜　ｌ　ｌ　麓颦　ｔ　译・螺　ｋ　壤　ｌ