1.0生物安全柜作业指导书

1. 目的：防止错误操作造成不必要的损失。

2. 适用范围：适用于BSC-1000-II-B1型生物安全柜。

3. 职责：质量部依本作业指导书进行对生物安全柜的操作。

4. 操作程序：

4.1准备

4.1.1按实验室等级要求穿戴好防护服、头盔、口罩、眼罩、手套等个人防护品；

4.1.2工作之前，生物安全柜的工作台面、内壁表面、观察窗内面应以70%浓度的乙醇或者1：100的稀释的漂白剂(即0.05%的次氯酸钠)擦拭，再用无菌水再擦拭一遍清除残余的氯，减小实验时的交叉感染；

4.1.3将电源插头插入固定插座后，将前窗操作口开启到200mm高度，首先应启动外排风机，在风机运转稳定后再启动安全柜风机，应使安全柜的风机至少运行3～5min以净化安全柜内空气，工作之前，应按实验所需物品清单先将实验材料置于安全柜内，并将工作椅高度调整到确保自己的脸部在工作窗开口之上，并使自己的手臂操作时保持适宜位置；

4.1.4开始工作前应关闭工作台下方的排水阀，这样，当有溢溅发生时，污染物就不会逸出安全柜外。

4.2操作

4.2.1操作开始时，应使手缓慢进入工作室，同时要注意手臂进入操作口后，应让流入气流流过手臂约一分钟后开始操作，这样能保持气流的稳定；

4.2.2操作应在操作台面上距进风格栅100mm距离内进行；

4.2.3为减少操作中的溢洒和气溶胶的产生，应严格执行生物安全操作规程(这些已有相关的国家标准和权威文件可供采用)；

4.2.4操作中应避免使用明火，保持操作室正常气流流态；

4.2.5操作结束后，所有物品从安全柜内取出前，必须进行表面除污消毒，取出工作室内物品后，应对工作室内壁四周用消毒剂进行消毒灭菌。

4.3结束

4.3.1在确认所有内壁已消毒完毕且已干燥后，建议让安全柜继续运行3～5min，以便净化柜内气体；

4.3.2关闭灯、风机，关闭前窗；

4.3.3按规定处理污染物品和搬移实验材料。

5.维护保养

5.1安全柜的日常维护和保养工作应视安全柜的不同区域采用不同的方法，维护和保养的重点是污染区的消毒清污。

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5.2日常维护保养

5.2.1实验室应编制日常使用保养计划，每次的操作后保养，均应有记录；

5.2.2每次操作前和操作后，都应对操作区作清洁消毒，以确保安全柜的正常使用；

5.2.3操作中若发生喷溅，应及时用吸水纸巾清除，放入生物危险灭菌袋内，大量的喷溅可按实验室已编制的危害处理程序处理(如用消毒液浸泡、冲洗等)。清理应在安全柜运行状态中进行；

5.2.4紫外线灯应每周进行表面清洁，以保证紫外线幅照的强度；

5.2.5安全柜在安装和使用一定周期后，应按法定程序对安全柜的整体运行性能进行确认，这种工作应有资质的专业机构或专业人员进行。

5.3风机、高效过滤器的维护和更换

BSC-1000Ⅱ B2生物安全柜的排风高效过滤器安装于安全柜上部的负压腔内，而且都处于受污染区域，所以凡涉及高效过滤器的维护和改换，都应经过消毒净化处理后方能打开上风罩进行：

5.3.1高效过滤器的更换

在确认所有，受污染区域已进行除污消毒后，可按以下步骤进行过滤器的更换：

5.3.1.1卸去上风罩和前风板四周螺钉后，即可打开上风罩和前封板；

5.3.1.2旋开送风过滤器前部固定面螺丝和旋松排风过滤前后两边的固定螺母后，可平行取出

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送风过滤器和向上取出排风过滤器，然后以生物污染物品加以封装处理。

5.3.1.3再将新过滤器平行放入原位置，同时保持过滤器与安全柜安装面，固定框架四周位置均匀，使过滤器四周密封垫与安装面接触良好，然后按上述方法，加以旋紧到适宜程度，保证四周密封性。

5.3.1.4盖上前封板和上风罩上后旋紧螺钉，再在封板四周用密封胶加以均匀封固。过滤更换即告完成。

5.3.2风机的更换

风机更换的前期准备工作与更换过滤器一样，当前封板拆卸后，可开始维修或更换风机：

5.3.2.1拆卸风机电源接线；

5.3.2.2拆卸风机出风口与静压箱联接口的螺栓；

5.3.2.3旋松风机固定螺钉；

5.3.2.4脱卸风机；

5.3.2.5换上新风机后，按相同顺序进行固定连接；

5.3.2.6将静压箱与风机连接固定；

5.3.2.7接上风机电源，然后将前封板安装到位，并加以密封。

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风机经试运转，即可按照调换过滤器和风机后的程序，进行规定的检验确认。

5.4消毒方法和消毒剂的选择、使用

5.4.1工作室内表面及操作工具的表面消毒

在安全柜内所进行的生物操作，每次操作开始后结束后，都应对工作室内表面及操作工具，实验容器表面进行消毒去污。消毒一般采用70%乙醇或0.05%的次氯酸钠溶液擦拭表面，所有可能被污染的容器在未进行表面消毒之前，不能移出安全柜外，污染材料应放置在密封容器内，转移到孵箱或高压灭菌器内进行灭菌消毒。

5.4.2安全柜整机的消毒

安全柜在更换过滤器或日常维修之前，对已进行过传染性材料操作的生物安全柜必须进行消毒净化，同时生物安全柜在重新安放之前，必须对柜内操作的病原体进行危险评估，决定是否要消毒，目前最常用的方法是采用甲醛蒸汽薰蒸消毒，它能有效地对受污染的风道系统、过滤器进行消毒去污，薰蒸应在安全柜封闭的状态下，由有资质的专业人士进行。

薰蒸消毒法的主要消毒剂为：福尔马林(多聚甲醛)使用的中和剂为氨水(碳酸氢铵)。具体操作按照YY0569中附录B进行。

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