植物组织中钙调素免疫组化定位_金福兰

第期增年月了南京农业大叫学学报。植物组织中钙调素免疫组化定位金福兰广印丽萍周燮徐义俊卜南京农业大学礴甘植物生理教研组勿,侣万钙调素简称。是一种多功能的钙受体蛋白研究C,存在于一切真核细胞中,,参与胞内许多基本生理过程的调节常必要。am在组织和细胞中的分布对了解其生理功能非〔’,一尽管a,在动物学。,医学等领域中,Cam定位研究已有良好的开端a`〕,但在植物方面的研究报告仍属鲜见作者在研制成功Cm的RIA、和ELISA药盒,〔’)后选用该药盒所提供的兔抗Cm抗体和PPA等试剂石蜡切片法制备样品a建立了Cm的免疫组化定位的一种方法。材料和方法21植物材料。玉米的胚根与胚芽黄瓜的绿色子叶和黄化子叶油菜的雄性可育花与雄性不育花22主要试荆。4%多聚甲醛0.o/L盐酸经胺25ml0。2mol./L磷酸缓冲液a4%H:O:溶液兔抗CPPADABm抗体鸡血清(酶标葡萄球菌A蛋白)33尹一二氨基联苯二胺盐酸盐)(2二Cam的定位粗序,被检材料经4%多聚甲醛固定以上,,脱水脱酒精后石蜡包埋HOZ、石蜡切片50一60℃烤片48小时a进行二甲苯脱蜡复水用4%,Z封闲内源过氧化物酶后接兔抗C,m抗休,再经PPA组化反应DAB染色后在光学显微镜下观察记录、拍照。结玉米胚根中Cam分布不均匀,果、与分析在根冠后生木质部及皮层细胞中较多,玉米胚芽原形成南层区域京。农业大学学报,期增分布特别多照片略黄瓜绿色子叶和黄化子叶中,、Cam分布差异不甚显奢.,都表现为棚栏组织比海绵组织染色深尤其是靠近表皮的一层棚栏细胞染色更深(照片略)对,比照片l和照片2可见油菜的花曹花瓣表皮内第一层细胞及其维管束染色明显可育花绒a,毡层细胞内分布特别多,而不育花药隔维管束中Cm集中存在,a绒毡层区域未见Cm分布。污气、照片1油菜雄性不育花横切x20箭头a示花瓣维管束箭头b示药隔维管束,。照片2油菜雄性可育花横切x20箭头c示花瓣维管束箭头d示绒毡层箭头e示花瓣表皮内一,,层着色明显`玉米根尖Cam的定位结果与孙大业等〔)做出的结果相似,。a根冠中较多的Cm分布很可能与其重力反应有关育花及不育花中C总之,。Cam拮抗剂的实验结果支持了这种推论,。,玉米胚芽中Cam特别集中似。乎是其组织分化的开始a意味着C,am的异质性与其形态建成可能有重要的联系,油菜雄性可。m含量和分布的显著差异a为研究植物雄性不育的工作提供了重要线索细胞功能与Cm关系密切Cam的定量测定结合其定位研究将极大和促进这一领域的发展。主要今考文献1RONALDLocJEion。GORI训〕N,oKEITHBintileWILLIAMeSo,andaSAVLPUSZKINTrIlxuuu。alizatfCalmodulin;iliatedeellsfHmsteraeheal,EPitheliumNANCYDastruet任raCellBiol,19829557一63,2。MARKCImmistrWILLINGHAM,JURGEN:WEHoIAND,CLAVDEBIRAHin,,KLEERICHERTunoeANGELINVVeRVTHERFORD,anodRASTANUltrJl-ytohemieealLoistryealization,fCalmaratoead奴lindyoC让ltltredCellsHistoehemyandCvtoChenremhLH1983o31eo成45~4613Lina皿CTrase。ChanoeTSeeamp,ivestuofpolyelo”alParandemaonoeloonaral-tibodiesfoi刀,immtytohemiealLhemARo,lizeuationf,e了tooliesastatmint”fe4。ralivdmterJHisto,ertoaemhleas1953,31:920MaihleNJni一DeanJReaMateasChfooJGinSatinarBH:Piurnrese几eeranredindirJeetm。”ofl的reseenloliz、ionfCalmdulinPa一neetetauliaCellBiol51981,、89:,695赵升皓1988,一于宏林o。张明志,涂义俊、周燮、陆玲钙调素的酶联免疫测定法SONG徐州{冲训流学报CalmoNa(8)16CHINJARNGLINDAYESUNLoeGUO一XINGandJEN一YENWU(5)d一,lin:aliztioni刀plant`rissuesJHistoehemeytoehefn一980,No