沈阳医学院学报Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ第１４卷第２期２０１２年６月 甲磺酸托烷司琼含量测定 石云龙 ，孟祥军 （１．沈阳医学院沈洲医院药剂科，辽宁沈阳１１０００２；２．沈阳医学院基础医学院化学教研室） ［摘要］目的：建立高效液相色谱法对甲磺酸托烷司琼注射液进行含量测定。方法：色谱柱为Ｋｒｏｍａｓｉｌ １００－５Ｃ。 （２５０ ｎｍ ｘ４．６ ａｍ，５ ｍ），以甲醇一水一乙腈一三乙胺（７５０：２００：５０：０．２）为流动相；流速为１．０ ｍｌ／ｍｉｎ；检测波长为２８４ ｎｍ。结果：甲磺酸托烷司琼检测量在１．６—２．４ ｇ范围内，与色谱峰面积线性关系良好，Ｙ＝２ ５４７．２Ｘ＋３．４５６，，＝１；准 确度试验中回收率为９９．９９％（ＲＳＤ＝０．５１％，，ｌ＝９）。结论：本文建立的含量测定方法快速、准确、重现性好，含量测定 ＨＰＬＣ检查方法专属性强、灵敏度高，可用于甲磺酸托烷司琼注射液的质量控制。 ［关键词］甲磺酸托烷司琼；含量测定；高效液相色谱法 ［中图分类号］Ｒ９２７．２ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００８—２３４４（２０１２）０２—００９６—０２ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８—２３４４．２０１２．０２．０１３ Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ Ａｃｉｄ Ｔｒｏｐｉｓｅｔｒｏｎ ＳＨＩ Ｙｕｎ．１ｏｎｇ ，ＭＥＮＧ Ｘｉａｎｇ－ｊｕｎ （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，Ｓｈｅｎｚｈｏｕ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ａｆｉｌｉｆａｔｅｄ ｔｏ Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ １１０００２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＣｈｅｍｉｓｔ￣， Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｔｒｏｐｉｓｅｔｒｏｎ ｉｎｊｅｅｔａ ｔｈｒｏｕｇｈ ＨＰＬＣ． Ｍｅｔｈｏｄ：Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ：Ｋｒｏｍａｓｉｌ １００－５Ｃ１８（２５０ ｎｍ ｘ４．６ ｎｍ，５ Ｉｘｍ），ｍｏｂｉｌｅ：ｔｈｅ ｍｉｘｔｕｒｅ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ，ｗａｔｅｒ，ａｃｅｔｏ— ｎｉｔｒｉｌｅ，ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（７５０：２００：５０：０．２，Ｖ／Ｖ／Ｖ／Ｖ）；ｆｌｏｗ ｒａｔｅ：１．０ ｍｌ／ｍｉｎ；ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ：２８４ ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｐｅａｋ ａｒｅａ ｗａｓ ｂｅｔｔｅｒ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｅｘｔｅｎｔ ｆｒｏｍ １．６ ｔｏ ２．４ ｇ，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ Ｙ＝２ ５４７．２Ｘ＋３．４５６，ｒ＝１；ｔｈｅ ｒｅｃｏｖ— ｅｒｙ ｗａｓ ９９．９％（ＲＳＤ＝０．５ １％，ｎ＝９）ｉｎ ａｃｃｕｒａｃｙ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｍｅｔｈｏｄ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｉｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎ ｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｔｒｏｐｉｓｅｔｒｏｎ ｉｎｊｅｃｔａ ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｃｈａｒａｃｔｅｉｒｚｅｄ ｂｙ ｑｕｉｃｋ，ａｃｃｕｒａｔｅ，ｗｅｌｌ ｉｎ ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ，ｈｉｇｈ ＨＰＬＣ ｓｐｅｃｉ— ｉｆｅｉｔｙ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｔｒｏｐｉｓｅｔｒｏｎ；ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ 甲磺酸托烷司琼是一种外周神经原及中枢神 经系统５一羟色胺３（５－ＨＴ３）受体的高效、高选择 性竞争拮抗剂。用于预防和治疗癌症化疗引起的 恶心和呕吐。在控制强致吐化疗药物的急性呕吐 及改善食欲不振方面疗效好，不良反应少 。甲 磺酸托烷司琼注射液现行质量标准为国家食品药 品监督管理局甲磺酸托烷司琼注射液试行标准 ＷＳ－６９５（Ｘ－５０９）－２００２（北京四环医药科技有限 公司）。该标准影响因素较多，试剂配制繁杂且有 定毒害，操作步骤也较繁琐。该制剂在《中国 药典》化学药品标准第二册中没有收载。为了更 好地控制本产品质量，提高甲磺酸托烷司琼注射 液试行标准，保证产品的疗效，本文参照国家食 品药品监督管理局盐酸托烷司琼注射液进口标准 （ＪＸ２００４０２２４） ，采用高效液相色谱法对甲磺酸 托烷司琼注射液中有关物质进行研究，建立了快 速、准确、专属性强、灵敏度高的有关物质检查 一１材料与方法 １．１仪器与试剂 １．１．１仪器ＡＵＷ１２０Ｄ型电子天平（１／１０万） （日本岛津仪器有限公司）、检测器ＳＰＤ－２０Ａ、高 压泵ＬＣ－２０Ａ、系统控制器ＣＢＭ－２ＯＡｌｉｔｅ高效液相 色谱仪（日本岛津仪器有限公司）。 １．１．２主要试剂甲磺酸托烷司琼对照品（自制 工作对照品，纯度为９９．８％），甲磺酸托烷司琼注 射液（山西诺成制药有限公司），规格：２ ｍｌ：６ ｎａｇ（以甲磺酸托烷司琼计）。（批号为１０１０１０１１、 １０１０１１１１、１０１０１２１１），乙腈（色谱纯），甲醇 （色谱纯），三乙胺（色谱纯），水（纯化水）。 １．２实验方法 １．２．１色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填 充剂，流动相为甲醇一水一乙腈一三乙胺（７５０： ２００：５０：０．２）；流速为１．０ ｍｌ／ｍｉｎ；检测波长 方法，可更好用于本品的质量控制。 ２８４ ｎｍ；柱温为室温；进样量２０ １。 第２期 石云龙等．甲磺酸托烷司琼含量测定 １．２．２溶液的配制 供试品溶液：取本品适量， 精密称定，用流动相Ａ溶解并稀释制成每ｍｌ中含 有甲磺酸托烷司琼１ ｍｇ的溶液，作为供试品溶 液。对照溶液：精密称取供试品溶液１ ｍｌ，置２００ ｍｌ量瓶中，加流动相Ａ稀释至刻度，摇匀，作为 对照溶液。 １．２．３检测波长的选择取甲磺酸托烷司琼对照 品适量，加流动相溶解并稀释制成每ｌｍｌ含有甲磺 酸托烷司琼１Ｏ ｇ的溶液，照紫外分光光度法（中 国药典２０１０年版二部附录ⅣＡ），在１９０～４００ ｎｍ 处扫描，甲磺酸托烷司琼在２８４ ｎｍ处有最大吸收， 标准中确定的检测波长是本品的特征吸收峰，选择 合理，因此确定标准中的检测波长为２８４ ｎｍ。 ２结果 ２．１线性实验精密称取甲磺酸托烷司琼对照品 约１３．４ ｍｇ，置１０ ｍｌ量瓶中，加流动相溶解并稀 释至刻度，摇匀，作为储备液。精密量取贮备溶 液０．８、０．９、１．０、１．１、１．２ ｍ１分别置１０ ｍ１量瓶 中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取２Ｏ ｌ 注人液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积（Ａ）对 检测量（ ｇ）进行线性回归（ｎ＝５），得回归方 程为：Ｙ＝２ ５４７．２Ｘ＋３．４５６，ｒ＝１。结果表明，以 高效液相色谱法测定甲磺酸托烷司琼的检测量在 １．６～２．４ ｇ范围内线性关系良好。 图１ 甲磺酸托烷司琼标准曲线图谱 ２．２重复性实验取本品（批号１０１０１０１１），取 装量差异项下的内容物，精密量取适量，加流动 相稀释制成每１ ｍ１含０．１ ｍｇ的溶液，精密量取２０ ｌ注入液相色谱仪，连续测定６次，记录色谱图； 另取甲磺酸托烷司琼对照品适量，同法测定，按 外标法以峰面积计算，即得。ＲＳＤ为０．１５％，结 果表明，保留时间及含量测定结果的ＲＳＤ≤ ２．０％，本方法重复性良好。 ２．３稳定性实验取同一供试品溶液分别于配制 后０、１、２、３、４ ｈ时内按“３．２．１”项下的色谱 条件进行测定，连续测定５次，记录色谱图；另 取甲磺酸托烷司琼对照品适量，同法测定，按外 标法以峰面积计算，即得。ＲＳＤ为０．１５％，结论： ５次进样所得的含量结果的ＲＳＤ值均＜２．Ｏ％，表 明供试品溶液在４ ｈ内稳定。 ２．４耐用性实验 分别考察流动相比例变化± ２％、流动相ｐＨ值变化－．Ｉ－０．２、柱温变化±５℃、 检测变化±２ ｎｍ、流速变化±５％以及采用三根不 同批号的色谱柱进行测定时，每个条件下各测试 两次，可接受的标准为：主成分峰的拖尾因子不 得大于２．０，主成分峰与其他成分峰必须达到基线 分离；各条件下的含量结果（ｎ＝１８）的相对标准 差应不大于２．０％。结论：试验结果表明，ＲＳＤ均 小于２％，本测定方法稳定，不会受到客观因素的 影响，准确度高。 ２．５ 准确度实验 按处方量的８０％、１００％、 １２０％精密称取甲磺酸托烷司琼对照品（含量 ９９．８％）各３份，加入相同辅料，再加流动相稀 释制成甲磺酸托烷司琼质量浓度分别为０．０８、 ０．１０、０．１２ ｍｇ／ｍｌ的溶液，精密量取２０ ｌ注入液 相色谱仪，记录色谱图；另取甲磺酸托烷司琼对 照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算， 即得ｘ（平均值）＝９９．９９％，ＲＳＤ＝０．５１％。 结论：本法回收率ＲＳＤ＜２．０％，准确度良 好。表明本方法准确可靠。 ２．６含量测定含量测定结果１０１０１０１１、１０１０１１１１、 １０１０１２１１分别为９９．８％、９９．８％、９９．６％。 ３讨论 对于高效液相色谱法含量测定，原采用以甲 醇一水一乙腈一三乙胺（７５０：２００：５０：０．３）为流 动相，色谱峰形较好，但是考虑到三乙胺加入量 较多会对色谱柱损害较大，所以采用以甲醇一水 一乙腈一三乙胺（７５０：２００：５０：０．２）为流动相。 经上述方法学验证，本标准中最后确定的色 谱条件及检测方法能够准确检测产品含量及其相 关杂质，符合国家食品药品监督管理局甲磺酸托 烷司琼注射液试行标准中相关杂质的限度要求， 可以有效控制产品质量。本文建立了专属、灵敏、 快速、准确的甲磺酸托烷司琼注射液的含量测定， 可以更好的控制该药品的质量。 参考文献： ［１］王宏宇，冯奉仪，李青．甲磺酸托烷司琼预防化疗药物引起 的恶心呕吐（Ⅱ期临床试验报告） ［Ｊ］．中国新药杂志， ２００１，１０（３）：２２６—２２７． ［２］盐酸托烷司琼注射液．ＪＸ２００４０２２４．国家食品药品监督管理 局．国家进口药品注册标准［Ｓ］．２００５，ｌ一３． ［收稿日期］２０１１—１０—２４
