一种串联表达小干扰RNA重组慢病毒载体的构建方法[发明专利]
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专利名称：一种串联表达小干扰RNA重组慢病毒载体的构建方
法
专利类型：发明专利
发明人：郭德银,柳叶,陈宇,申彦森申请号：CN200910062850.3申请日：20090626公开号：CN101684478A公开日：20100331
摘要：本发明公开了一种串联表达siRNA重组慢病毒载体的构建方法，主要步骤如下：(1)单靶点的siRNA重组慢病毒载体的构建：a.化学合成寡核苷酸链；b.有义链、反义链退火；c.退火片段连接至载体(2)双靶点的siRNA重组慢病毒载体的构建：a.利用PCR从单靶点的siRNA重组慢病毒载体中扩增U6/H1－siRNA表达框；b.将表达框连接至经XhoI酶切的单靶点的siRNA重组慢病毒载体；c.酶切鉴定筛选表达框正向插入的克隆；(3)多靶点的串联siRNA重组慢病毒载体的构建：将U6/H1－siRNA表达框插入至双靶点的siRNA重组慢病毒载体，构建出三靶点的siRNA重组慢病毒载体，同法可获得多靶点串联的siRNA重组慢病毒载体。本发明适用于同时表达针对多个靶基因的siRNA，适用于长期沉默多个靶基因的研究。
申请人：武汉大学
地址：430072 湖北省武汉市武昌珞珈山
国籍：CN
代理机构：武汉宇晨专利事务所
代理人：王敏锋
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